Multipruebas (API)

SISTEMAS COMERCIALES MANUALES O GALERIA (API).

OBJETIVO.

Identificación de bacterias con la realización de entre 10 y 50 pruebas bioquímicas distintas que se desarrollan a la vez.

FUNDAMENTO.

Estos sistemas consisten en unas placas con celdillas identificadas según la prueba que se desarrolle en ellas y que contienen un sustrato específico para esa prueba.

los resultados se expresan de forma numérica, siguientes las instrucciones, y con todos ellos se obtiene un código numérico y utilizando ese código se identifica la bacteria.ç

El que vamos a realizar para esta práctica es el ID 32 E.

MATERIAL.

Papel de filtro
Mechero Bunsen
Asa de siembra de platino
Tubo de ensayo
Pipeta pasteur
Tubo escala 0'5 McFarland
Gradilla
Micropipeta
Suero salino fisiológico
Parafina
Galería ID 32 E
Siembra con bacteria


PROTOCOLO

Se prepara la mesa de trabajo con todo el material necesario, se enciende el mechero bunsen para poder mantener un ambiente de trabajo estéril.

Lo primero que se realiza es una suspensión bacteriana de 0'5 en la escala de McFarland y para ello con el asa de siembra, esterilizada con el fuego del mechero bunsen, se coge un inóculo de la bacteria.

En el tubo de ensayo, al que se le ha echado aproximadamente unos 2 ml de suero salino fisiológico, se introduce el asa de siembra con inoculo de la bacteria y se disuelve hasta alcanzar la misma turbidez que el tubo 0'5 de McFarland.

Una vez preparada la suspensión se tienen que inocular 55 ul de la suspensión bacteria en cada celdilla de la galería ID 32 E, la cual debemos rotular con la fecha de la siembra.

Se le debe echar parafina a las celdillas cuyas pruebas estén subrayadas.

A continuación, colocamos la galería sobre un soporte con celdillas, a la que previamente se le ha echado un poco de agua destilada para que cuando se cultive no se deshidrate, y se tapa con un cubregalerías.

Se pone a incubar en la estufa a 37ºC y se leen los resultados a las 24h.

RESULTADOS

Tras la incubación se leen los resultados.

A la prueba del Indol hay que echarle una gota del reactivo Kovac para que se pueda leer el reultado.

Se podrán leer los resultados como positivo o negativo, según las instrucciones que vienen con la galería, dependiendo del color de la celdilla.

Los resultados se apuntan en una planilla y se obtendrá un código de identificación.

Ejemplo de como obtener el código de identificación de la bacteria.

Los resultados obtenidos son los siguientes:

La bacteria tiene un código de identificación 002002440.