Prueba de la Coagulasa

PRUEBA DE LA COAGULASA

OBJETIVO

Se determina la capacidad de una bacteria de coagular el plasma en presencia de la enzima de la coagulasa.

FUNDAMENTO

La coagulasa es una enzima que convierte el fibrinógeno en fibrina.
Se utiliza para diferenciar Staphylococcus aureus (coagulasa positiva) de otras especies de Staphylococcus (coagulasa negativa).
Si al realizar la prueba se forma un coagulo visible, como una maraña blanquecina, será coagulasa positiva, si no se forma el coagulo será coagulasa negativa.

MATERIAL

Papel de filtro
Mechero bunsen
Asa de siembra
Tubo de hemólisis
Gradilla
Micropipeta
Baño
Cultivo de bacterias 2 y 9
Plasma

PROTOCOLO

Se prepara el material necesario en la mesa de trabajo y se enciende el mechero bunsen para mantener una zona estéril de trabajo.

Preparamos un tubo de hemólisis con unos 500 ul de plasma con ayuda de una micropipeta.


Esterilizamos el asa de siembra y cogemos un inóculo de la bacteria 2, haremos la misma operación para la bacteria 9, y la disolvemos en el tubo de hemólisis con el plasma. Mezclamos por rotación.















Se incuba en el baño a 37ºC y cada poco tiempo se va observando si se forman coagulos o no hasta que se alcancen las 4h y si no ha coagulado se considera que es negativa la prueba.














RESULTADOS

La bacteria 2 y 9 son coagulasa negativa ya que en ninguna de las dos se ha formado coagulo.

Bacteria 2 y 9 coagulada negativa

Comentarios

Publicar un comentario

Entradas populares de este blog

Escala de McFarland

Imagen
ESCALA DE MCFARLAND OBJETIVO. Se utilizan métodos de recuento estimado basados en la tubidez para realizar una estimación del número de bacterias totales, tanto viables como no viables. En este caso utilizaremos el método de estándares de turbidez de McFarland. FUNDAMENTO. Los estándares de McFarland son patrones de turbidez basados en suspensiones de sulfato de bario. La escala de McFarland consta de 11 patrones (desde 0,5 a 10) cada uno de los cuales tiene una turbidez comparable a la de una suspensión bacteriana con una densidad determinada. Para estimar la densidad bacteriana de una suspensión se compara visualmente su turbidez con la de los patrones realizados en la escala de McFarland, utilizando un fondo de contraste. MATERIAL. 11 tubos de ensayo para escala de McFarland Matraz de 500ml Matraz de 50 ml Vaso de precipitado Papel de filtro Embudo Pipeta pasteur Varilla Vidrio de reloj Espátula Balanza Pipeta de cristal y cremallera Microp
Leer más

Tinción simple con azul de metileno

Imagen
  TINCIÓN SIMPLE CON AZUL DE METILENO. OBJETIVO. Se utiliza el colorante para teñir los diferentes microorganismos para su posterior observación mientras aún siguen vivos. FUNDAMENTO. La tinción simple se utiliza como único colorante disuelto en disolución acuosa o alcohólica, de manera que todas las bacterias presentes en la extensión se tiñen por igual, de forma homogénea. El uso del colorante se puede suplementar con un mordiente que ayuda a la fijación del colorante. La tinción azul de metileno es una tinción positiva (colorea las bacterias) y se realiza sobre extensiones fijadas por calor. MATERIAL. Papel de filtro Asa de siembra de platino Mechero Bunsen Pinza de madera Portaobjetos Gradilla Puente de tinción Colorante azul de metileno Suero fisiológico Muestra: Actimel PROTOCOLO. Preparamos todo el material necesario en la mesa de trabajo. Encendemos el mechero Bunsen para tener una zona de trabajo estéril y para poder e
Leer más

Prueba de KIA

Imagen
PRUEBA DE KIA OBJETIVO Tras la siembra en medio Agar de hiero de Kligler se quiere identificar Enterobacterias. FUNDAMENTO Identificación de Enterobacterias fermentadoras de glucosa y lactosa, que producen gases como el producto final del metabolismo y precipitación de ácido sulfhídrico que se observan como sales de hierro de color negruzco. MATERIAL Papel de filtro Mechero Bunsen Gradilla Asa de siembra Siembra de bacterias 2 y 9 Medio de cultivo KIA PROTOCOLO Se prepara la mesa de trabajo con todo el material necesario y se enciende el mechero bunsen para mantener una zona de trabajo estéril. Se coge un inóculo de la bacteria 2, esterilizando y enfriando el asa de siembra, y se realiza la siembra en el agar KIA. ` La siembra se realiza haciendo una picadura en el agar y al sacar la punta del asa se termina la siembra realizando una estría en la superficie. Realizamos la misma acción con la bacteria 9.   Se incuba a 37ºC dura
Leer más