Prácticas de Laboratorio: Microbiología

ANTIBIOGRAMA EN MUELLER HINTON. OBJETIVO. Es un  proceso microbiológico que permite determinar la sensibilidad o resistencia de una cepa bacteriana frente a un grupo de antibióticos. FUNDAMENTO. Con esta practica se quiere evaluar la concentración mínima inhibitoria (CMI) que es la sensibilidad que tiene una bacteria a un antibiótico. Para ello vamos a usar la técnica de Kirby-Bauer que consiste en poner unos discos de papel de filtro impregnados con una cantidad especifica de antibiótico. Estos disco se colocan sobre una placa con un cultivo bacteriano para poder saber la resistencia de estas a los antibióticos. Si la cepa es sensible al antibiótico es porque la bacteria no es resistente a él y por lo tanto no puede crecer pero si la cepa es resistente a esa antibiótico si crecerá alrededor del disco. MATERIAL. Mechero Bunsen Papel de filtro Asa de Digralsky Asa de siembra de platino Gradilla 2 tubos de ensayo para suspensión bacteriana ...

ESCALA DE MCFARLAND OBJETIVO. Se utilizan métodos de recuento estimado basados en la tubidez para realizar una estimación del número de bacterias totales, tanto viables como no viables. En este caso utilizaremos el método de estándares de turbidez de McFarland. FUNDAMENTO. Los estándares de McFarland son patrones de turbidez basados en suspensiones de sulfato de bario. La escala de McFarland consta de 11 patrones (desde 0,5 a 10) cada uno de los cuales tiene una turbidez comparable a la de una suspensión bacteriana con una densidad determinada. Para estimar la densidad bacteriana de una suspensión se compara visualmente su turbidez con la de los patrones realizados en la escala de McFarland, utilizando un fondo de contraste. MATERIAL. 11 tubos de ensayo para escala de McFarland Matraz de 500ml Matraz de 50 ml Vaso de precipitado Papel de filtro Embudo Pipeta pasteur Varilla Vidrio de reloj Espátula Balanza Pipeta de cristal y cremallera Microp...

TINCIÓN DE WIRTZ-CONKLIN (TINCIÓN DE ESPORAS) OBJETIVO. Usar colorantes para saber si las bacterias que se encuentran en la muestra espurulan o no. FUNDAMENTO. Teñir endosporas bacterianas es muy complicado por su situación y su estructura. Para ello vamos a utilizar un colorante en caliente, verde malaquita al 5%, para facilitar la penetración del colorante en el interior de las esporas y usaremos un colorante de contraste, safranina al 0,5% para teñir el resto de bacterias (Bacilos que no hayan espurulado). Como resultado observaremos las esporas de color verde y los bacilos sin espurular de color rosa. MATERIAL. Papel de filtro Mechero Bunsen Portaobjetos Asa de siembra de platino Pipeta pasteur Gradilla Rejilla metálica Pinza de madera Vaso de precipitado Tolunda con algodón y gasa Tubo con muestra ESP1,ESP2, 2 y 9. Microscopio óptico REACTIVOS. Verde malaquita al 5% Safranina al 0,5% Suero fisiológico Agua destilada. ...

TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN (BAAR) OBJETIVO. Usar colorantes para teñir las bacterias y así poder diferenciarlas según su resistencia a la decoloración con una mezcla Ácido-Alcohol. FUNDAMENTO. En esta técnica queremos diferenciar las bacterias que son ácido alcohol resistentes (BAAR), que son bacilares, de las que no son. Para ello primero usamos un colorante básico en caliente. Las BAAR presentan en su pared ácidos micólicos y ceras que al calentarse dejan pasar el colorante en su interior, en este caso fucsina fenicada. Después se usa un Ácido-Alcohol en frio. Los ácidos micólicos y ceras de la pared de las BAAR se enfrian y se solidifican dejando al colorante atrapado en su interior, mientras que las que no son BAAR se decolorarán. Para terminar se una un colorante de contraste, azul de metileno, que solo teñirá las que no sean BAAR. Como resultados observaremos las BAAC de color rosa y las que no lo son de un azul-violeta. MATERIAL. Papel de filtr...